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（l）基因工程中切割DNA的工具酶是限制性核酸内切酶，DNA连接酶根据其来源不同可分为E?coliDNA连接酶和 T 4 DNA连接酶 ，E?coliDNA连接酶来源于大肠杆菌 ，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T 4 DNA连接酶来源于T 4 噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端．
（2）利用PCR技术扩增目的基因的前提 ，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便根据这一序列合成引物．
（3）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建．基因表达载体中含有启动子和终止子 ，启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，它能驱动基因转录出mRNA．
（4）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法．
（5）常用DNA分子杂交技术检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶（限制酶）E?coli?DNA连接酶?T 4 DNA连接酶
（2）引物（引物对）
（3）基因表达载体的构建?RNA聚合酶
（4）农杆菌转化法
（5）DNA分子杂交
基因工程的生物学原理
解题思路：1、DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶） 、DNA连接酶 、运载体．常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．
2 、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列 ，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂 ，形成黏性末端和平末端两种．
A 、基因工程中常用的工具酶有DNA连接酶、限制性核酸内切酶，运载体不属于工具酶 ，A错误；
B 、一种限制酶都只能识别一种特定的核苷酸序列 ，即具有特异性，B错误；
C 、目的基因进入受体细胞需要检测和鉴定 ，不一定能成功实现表达 ，C错误；
D、选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快，并且遗传物质少，D正确．
故选：D．
,10,下列有关基因工程技术的叙述中 ，正确的是（）
A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶 、连接酶和运载体
B．所有的限制酶只能识别同一种特定的核苷酸序列
C．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达
D．选用细菌作为重组质粒的受体细胞的原因之一是细菌繁殖快
基因工程是在现代生物学 、化学和工程学基础上建立和发展起来的 ，并有赖于微生物学理论和技术的发展，现在
A、基因工程又叫DNA重组技术 ，基因工程的生物学原理是基因重组 ，A正确；
B 、按照人们的意愿，通过体外DNA重组和转基因等技术定向改造生物的性状 ，B正确；
C 、DNA重组技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶 ，其中基因的针线是DNA连接酶，C正确；
D 、基因工程的运载体包括质粒 、噬菌体和动植物病毒 ，其中质粒是基因工程中最常见的载体 ，在原核细胞中广泛存在，D错误．
故选：D．
（1）在基因工程中 ，目的基因与载体结合形成重组DNA ，载体常用质粒．基因工程的工具酶是限制酶和DNA连接酶．
（2）碱基互补配对发生在DNA分子、RNA分子之间，①过程目的基因的DNA分子中有碱基互补配对，②过程目的基因DNA与质粒的黏性末端配对 ，④过程中基因的表达有碱基互补配对 ，故基因工程中①②④有碱基互补配对．
（3）不同种生物之单曲的基因移植成功的原因是不同生物的DNA结构相同、共用一套遗传密码．
（4）基因工程的原理是基因重组．
（5）根据题意，已培养出抗病植株 ，所以目的基因已表达．如将基因导入叶绿体DNA中 ，将来产生的精子中不含有抗病基因，卵细胞中含有抗病基因 ，故配子中不一定含有．
故答案为：
（1）载体?质粒?限制性核酸内切酶和DNA连接?
（2）①②④
（3）不同生物的DNA结构相同 、共用一套遗传密码?
（4）基因重组?
（5）目的基因（抗枯萎病的基因）已表达?不一定
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我是雷讯号的签约作者“竹瑞玲”
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